Kwalitatieve PCR-analyse voor de detectie van hepatitis C

Hepatitis C is een ernstige virale ziekte die in het lichaam van een patiënt optreedt onder invloed van bacteriën zoals HCV. Afhankelijk van het ontwikkelingsstadium kan een dergelijke pathologie zonder symptomen verlopen of zich manifesteren als geelzucht, verminderde activiteit en andere functionele stoornissen. Tegelijkertijd kan deze aandoening alleen in de eerste paar weken worden genezen, terwijl de ziekteverwekker zich in de incubatietijd bevindt. Een kwalitatieve analyse voor hepatitis C kan een infectie in de beginfase diagnosticeren.

Algemene feiten over hepatitis C

Categorie C-hepatitis wordt beschouwd als de gevaarlijkste van alle soorten virale pathologieën, omdat het een zeer hoge neiging tot mutatie heeft. Eenmaal in het lichaam veranderen de RNA-componenten voortdurend van structuur, waardoor het immuunsysteem niet zelfstandig de juiste antilichamen kan aanmaken voor een natuurlijke genezing van de ziekte. Hierdoor kan de infectie zich zonder veel hinder verspreiden..

Na een paar weken muteert het virus in een zodanige toestand dat een persoon de eerste symptomen begint te voelen, die zich manifesteren in de vorm van:

  • Periodieke duizeligheid;
  • Misselijkheid of zelfs braken;
  • Chronische vermoeidheid;
  • Pijn in het rechter hypochondrium;
  • Verhoogde lichaamstemperatuur.


Na het stadium van exacerbatie wordt de ziekte chronisch. Met behulp van medicamenteuze therapie kan de patiënt hem alleen ondersteunen tijdens de incubatieperiode, waardoor herhaalde terugvallen worden vermeden.

Indicaties voor diagnostiek

Een kwalitatieve studie van RNA-cellen van het hepatitis C-virus wordt niet uitgevoerd op verzoek van de patiënt, indicaties voor een dergelijke procedure kunnen alleen zijn:

  • Onderzoek van weefsels die zijn gegroeid met behulp van biopsie;
  • Onderzoek naar leukemieën en kwaadaardige tumoren;
  • Diagnostiek van het organisme op de aanwezigheid van genetische pathologieën erin;
  • Identificatie van een persoon door de biologische vloeistoffen van de patiënt te vergelijken met de beschikbare biomaterialen;
  • Detectie van de veroorzaker van een virale infectie (met gemengde hepatitis).

Bovendien kan RNA-analyse een beoordeling van de effectiviteit van de huidige therapiekuur aantonen, wat erg belangrijk is bij de behandeling van een virale ziekte..

Wat is PCR-analyse

De studie van de polymerasekettingreactie is een diepgaande analyse van bloed, die wordt uitgevoerd om de cellen van het RNA van het virus erin te detecteren. Afhankelijk van de richting kan deze procedure het volgende aantonen:

  • De aan- of afwezigheid van hepatitis in het lichaam (kwalitatief type PCR);
  • Virale belasting van het immuunsysteem (een kwantitatieve test die het gehalte aan ribonucleïnezuur in het bloed aantoont);
  • Huidig ​​genotype van de ziekte (genotypering).

Van alle bovenstaande tests is alleen de eerste verplicht. Op basis van de resultaten van de ontsleuteling kan de arts meer informatie vinden over de huidige aandoening..

Belangrijkste voordelen van onderzoek

Als we PCR-analyse vergelijken met procedures als: OAC, ELISA en echografie, dan heeft de eerste test een aantal kenmerkende voordelen:

  • Hoge snelheid van verwerkingsresultaten;
  • Het vermogen om bijna alle menselijke biologische vloeistoffen te bestuderen (zweet, tranen, bloed, schrapen van het slijmvlies en zelfs het epitheel van de huid);
  • De aanwezigheid van een viral load-indicator;
  • Volledige desinfectie van het testmateriaal (een dergelijke procedure wordt uitgevoerd vóór de start van de PCR-analyse om infecties door de resulterende vloeistof te voorkomen);
  • Hoog informatie-gehalte (deze reactie toont niet alleen de aanwezigheid van het virus aan, maar bepaalt ook de aard ervan).

Het is belangrijk om te weten! Het enige nadeel van de PCR-test voor hepatitis C is de behoefte aan complexe training van personeel en apparatuur..

Hoogwaardige PCR voor hepatitis C

Het resultaat van een hoogwaardige PCR voor hepatitis C is een fundamentele indicator van de hele studie, omdat de arts hierdoor de aanwezigheid van pathologie bij een patiënt kan bepalen. Maar een negatieve reactie op de bovenstaande reactie duidt niet altijd op een volledig gezond lichaam. Immers, als het aantal RNA-cellen onder het toegestane niveau komt, zal PCR-scanning ze eenvoudigweg niet opmerken.

Interpretatie van analyseresultaten

Een kwalitatieve PCR-test voor de aanwezigheid van RNA uit hepatitis C-cellen kan slechts twee mogelijke reacties laten zien. Overweeg de waarden die de normale toestand van een persoon en de aanhoudende pathologie aangeven.

Norm

De normale indicator van een kwalitatieve polymerasekettingreactietest is een negatief testresultaat. Het wordt waargenomen bij nul virale belasting en de afwezigheid van een geïdentificeerd genotype. Maar om volledig zeker te zijn van hun veiligheid, is het beter voor de patiënt om een ​​aantal aanvullende procedures te ondergaan die ziekten aan het licht kunnen brengen die leiden tot infectie met hepatitis C..

Afwijkingen

Als de PCR-test een positieve reactie liet zien, is dit een duidelijk teken dat er een virus aanwezig is in het lichaam van de geteste persoon. Afhankelijk van de kwantitatieve waarde (van 1,8x tot 2,4x), kan de arts het huidige stadium van zijn ontwikkeling bepalen, wat de eerste stap zal zijn bij het opstellen van de juiste therapiekuur. En met behulp van genotypering kunt u de categorie hepatitis ook detecteren nog vóór de karakteristieke manifestaties (indicatoren B1, B2 of B3).

Fout-positieve en fout-negatieve resultaten

Op zichzelf is een PCR-test bijna nooit fout. Maar onder invloed van de menselijke factor neemt de kans op een verkeerde diagnose aanzienlijk toe. Om de meest correcte decodering te krijgen, moeten daarom de volgende regels in acht worden genomen voordat de polymerasekettingreactie wordt uitgevoerd:

  1. Alle bestudeerde biomaterialen dienen op een behoorlijke afstand van elkaar te staan ​​(de combinatie van eventuele biocomponenten zal altijd een vals positief resultaat opleveren);
  2. Het is noodzakelijk om de verkregen vloeistoffen voor analyse op te slaan en te vervoeren in speciale beschermde containers waar het temperatuurregime wordt waargenomen (biologische componenten verliezen heel gemakkelijk hun eigenschappen, wat ook de oorzaak wordt van een valse diagnose);
  3. Voordat met biomaterialen wordt gewerkt, moet de laboratoriumruimte goed worden behandeld, zodat er geen afval in de testvloeistof terechtkomt;
  4. Het gebruik van reagentia waarvan de vervaldatum is verstreken, is ten strengste verboden (dergelijke nalatigheid is niet ongebruikelijk in moderne medische instellingen).

Het is belangrijk om te weten! De juistheid van het verkregen PCR-resultaat kan ook afhangen van de patiënt zelf, als hij de regels voor het voorbereiden van bloedafname niet volgt. Het resultaat van elk van de genoemde situaties is een herlevering van de analyse.

Frequentie van PCR-analyse

De moderne geneeskunde legt geen beperkingen op aan hoogwaardige PCR-analyse voor hepatitis C. Maar een dergelijke procedure wordt voor elke categorie patiënten een bepaald aantal keren uitgevoerd. Namelijk:

  • Voor mensen in wiens lichaam er geen pathologie is - niet meer dan 1-2 keer per jaar;
  • Voor patiënten die een behandeling voor hepatitis C ondergaan - 2 keer (vóór aanvang van de therapie en dichter bij het midden);
  • Voor zwangere vrouwen - minstens 1-2 keer per maand, tijdens de zwangerschap (verder wordt de test niet vaker dan 2 keer per jaar uitgevoerd);
  • Voor baby's van een paar weken oud - minstens 2 keer per jaar.

Vanwege zijn onschadelijkheid wordt de PCR-methode vaak gebruikt, zelfs voor pasgeboren baby's, wat als een ander belangrijk voordeel wordt beschouwd..

In termen van kosten verschilt de procedure voor het uitvoeren van een polymerasekettingreactie aanzienlijk van standaardonderzoeken. Hierdoor kunnen sommige mensen het niet betalen. Maar volgens andere criteria heeft deze test geen concurrenten, dus artsen bevelen het het vaakst aan..

PCR-analyse van hepatitis C (hepatitis C-RNA)

PCR-analyse

Een kwalitatieve analyse geeft de aanwezigheid van een virus in het bloed aan. Deze test is nodig voor alle patiënten met antistoffen tegen hepatitis C. Het resultaat kan "gedetecteerd" of "niet gedetecteerd" zijn. Referentiewaarden (waarde die normaal zou moeten zijn) - "niet gevonden". Een gedetecteerd resultaat kan erop wijzen dat het virus zich vermenigvuldigt en nieuwe levercellen infecteert. Een kwalitatieve PCR-test heeft een zekere gevoeligheid (10-500 IU / ml.). Dit betekent dat als het virus in een zeer lage concentratie in het bloed aanwezig is (onder de gevoeligheidsdrempel van de methode), een resultaat "niet gedetecteerd" kan worden verkregen. Daarom is het bij het uitvoeren van hoogwaardige PCR bij patiënten met een lage viremie (virusconcentratie), bijvoorbeeld die antivirale therapie ondergaan, belangrijk om de gevoeligheid van het diagnostische systeem te kennen. Om de virologische respons tijdens antivirale therapie te beheersen, is het wenselijk om een ​​diagnostisch systeem te gebruiken met een gevoeligheid van ten minste 50 IE / ml. Aan deze criteria wordt bijvoorbeeld voldaan aan analysatoren COBAS AMPLICOR HCV-TEST (analytische gevoeligheid 50 IU / ml of 100 kopieën / ml), RealBest HCV RNA (analytische gevoeligheid 15 IU / ml of 38 kopieën / ml) en andere..

Waar is het veilig om nieuwe medicijnen voor hepatitis C te kopen? Naar onze mening is de meest optimale en betrouwbare manier om gebruik te maken van de diensten van bewezen providers op ons forum, die al honderden patiënten hebben geholpen om van deze ziekte af te komen..

PCR-kosten

PCR-analyse, waarvan de kosten afhankelijk zijn van de gebruikte reagentia, en kunnen variëren van 300 roebel. tot 5.000 roebel, uitgevoerd van een dag tot een week.

Naast de PCR-methode wordt ook de methode van transcriptionele amplificatie (TMA) gebruikt om HCV-RNA te detecteren, dat een betere gevoeligheid heeft (ongeveer 5-10 IU / ml), maar deze methode is nog niet wijdverspreid in Rusland.

Hoe vaak moet ik HCV-PCR doen? Het wordt meestal uitgevoerd onmiddellijk na de detectie van antilichamen tegen hepatitis C en na de 4e, 12e en 24e week van antivirale therapie, evenals 24 weken na voltooiing van de AVT, en vervolgens jaarlijks in geval van SVR..

Figuur: 1. Een voorbeeld van de resultaten van een kwalitatieve PCR van hepatitis C.

Kwantitatieve PCR-analyse (viral load) is een test voor de concentratie van het virus (viremie) in het bloed. Virale lading is het aantal eenheden genetisch materiaal (viraal RNA) dat aanwezig is in een bepaald volume bloed (meestal 1 ml, wat overeenkomt met 1 kubieke centimeter). Deze hoeveelheid wordt uitgedrukt in aantallen, maateenheden IU / ml (internationale eenheden per milliliter). De hoeveelheid virus kan op verschillende manieren worden weergegeven. Bijvoorbeeld 1,5 miljoen IU / ml, wat overeenkomt met 1.500.000 IU / ml of 1,5 * 106 IU / ml. Sommige laboratoria gebruiken andere meeteenheden - kopieën / ml. De omrekeningsfactor van kopieën naar internationale eenheden is verschillend voor verschillende testsystemen. De geschatte waarde kan opnieuw worden berekend volgens de formule 1 IE / ml = 4 kopieën / ml, bijvoorbeeld 5,5 * 10 5 IE / ml = 2,2 * 10 6 kopieën / ml.

Wat beïnvloedt virale lading??

Ten eerste besmettelijkheid. Hoe hoger de concentratie van het virus, hoe groter het risico op overdracht van het virus, bijvoorbeeld via geslachtsgemeenschap of door verticale overdracht. Ten tweede beïnvloedt de concentratie van het virus de effectiviteit van de behandeling (als de behandeling wordt uitgevoerd op basis van interferon). Een lage virale belasting is dus een gunstige factor tijdens de therapie en een zeer hoge is ongunstig. Kwantitatieve PCR is ook van groot belang bij het uitvoeren van interferontherapie voor het beoordelen van het succes en het plannen van de cursusduur. Dus, met een snelle reactie op de behandeling en een lage viremie vóór de therapie, kunnen de behandeltijden worden verkort. Omgekeerd kan bij een langzame afname van de concentratie van het virus de AVT worden verlengd.

Welke belasting wordt als laag beschouwd en welke is hoog?

Een hoge belasting wordt beschouwd als meer dan 800 * 103 of 800.000 IU / ml, wat ongeveer 300 * 104 of 3.000.000 kopieën / ml is. Een belasting van meer dan 1 * 10 7 IU / ml wordt als zeer hoog beschouwd. Er is echter nog geen algemene mening onder specialisten over de waarden die hoge en lage viremie onderscheiden. Dus in sommige werken wordt deze limiet beschouwd als het getal van 400.000 ME / ml..

Hoe vaak een kwantitatieve test moet worden uitgevoerd?

Meestal wordt het vóór de therapie en na de 12e week van de behandeling gedaan om de effectiviteit ervan te beoordelen als er nog steeds een hoogwaardige RNA-test wordt bepaald.

Het resultaat van een kwantitatieve test kan een kwantitatieve beoordeling van viremie zijn in het hierboven beschreven formaat, evenals resultaten 'onder het meetbereik' en 'niet gedetecteerd'.

De gevoeligheidsdrempel van kwantitatieve PCR is gewoonlijk hoger dan die van kwalitatieve PCR. Dus voor het COBAS AMPLICOR-systeem is het 600 ME / ml. Een 'niet gedetecteerd' resultaat kan erop wijzen dat de kwantitatieve test en de bevestigende kwalitatieve test geen viraal RNA detecteerden. Een resultaat 'onder het meetbereik' betekent dat de kwantitatieve test geen hepatitis C-RNA heeft gedetecteerd, maar dat het virus in een zeer lage concentratie aanwezig is (als een aanvullende bevestigende kwalitatieve test is uitgevoerd).

Figuur 2 Voorbeeld van kwantitatieve testresultaten.

Kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C: interpretatie van resultaten

Het RNA-virus komt de levercellen binnen en veroorzaakt de ziekte - hepatitis C. De ziekte is acuut en chronisch. Het wordt gekenmerkt door een stroom zonder zichtbare tekenen. Deze cursus wordt verklaard door het hoge vermogen van het virus om te muteren en het voorkomen van verschillende soorten. Dit helpt de ziekteverwekker om zich aan de gastheer aan te passen en de immuunafweer te ontwijken..

Onderzoek in de vroege stadia van ontwikkeling is niet effectief. Kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C wordt uitgevoerd om de ziekteverwekker te identificeren en de behandeling op tijd te starten.

Waar zal ik over te weten komen? De inhoud van het artikel.

Wat is een kwalitatieve hepatitis C-test?

Hepatitis C is een ernstige ziekte met chronische ontwikkeling van cirrose en leverkanker. Wetenschappers hebben lange tijd geen vaccin tegen de ziekte kunnen ontwikkelen, ondanks het bestuderen van de structurele kenmerken van HCV. De variëteit aan pathogene soorten is slecht bestudeerd.

Alleen met behulp van laboratoriumtests kan orgaanschade worden opgespoord en kan de infectie van anderen worden voorkomen. Hiervoor wordt een kwalitatieve PCR-test voor hepatitis C uitgevoerd..

De drager kan vele jaren besmet zijn en zich niet bewust zijn van de ziekte. Een kwalitatieve analyse omvat het uitvoeren van een polymerasekettingreactie van het bloed van de patiënt in het laboratorium op de aanwezigheid van het RNA-virus. Diagnostiek wordt uitgevoerd op ultragevoelige medische apparatuur die helpt bij het detecteren ervan.

Wat de kwalitatieve analyse laat zien?

Een hoogwaardig onderzoek met PCR heeft voordelen ten opzichte van andere methoden:

  • Deze methode helpt om het genetisch materiaal van de ziekteverwekker in een vroeg stadium te identificeren;
  • toont het type ziekteverwekker;
  • er wordt een testsysteem gebruikt, het materiaal hoeft niet in een voedingsbodem te worden gezaaid;
  • heeft een hoge snelheid van diagnose van de ziekteverwekker: het analyseresultaat is binnen 5 uur klaar;
  • onthult verborgen infectie.

Een kwalitatieve analyse wordt voorgeschreven tijdens een routineonderzoek, wanneer er aanwijzingen zijn voor het gedrag ervan. Het wordt uitgevoerd tijdens de behandeling, na herstel. Met zijn hulp wordt de aan- of afwezigheid van antilichamen van het hepatitis C-virus in het bloed bevestigd.

  • kwantitatieve inhoud van het HCV-genotype;
  • kwalitatieve kenmerken van viraal RNA;
  • genotypering.

Test opnieuw om het resultaat te bevestigen met een gevoeliger reagens.

Indicaties voor onderzoek

Om PCR van hoge kwaliteit uit te voeren, zijn voorwaarden voor de benoeming noodzakelijk:

  • geslachtsgemeenschap met een persoon die is geïnfecteerd met het hepatitis-virus;
  • levercirrose;
  • verplicht onderzoek voor de operatie;
  • vaccinatie tegen het hepatitis B-virus;
  • routineonderzoek van medewerkers van medische instellingen, kleuterscholen, scholen.

Als de patiënt duidelijke tekenen van hepatitis vertoont:

  • geelheid van de huid, wit van de ogen;
  • pijn in het rechter hypochondrium;
  • vermoeidheid;
  • een toename van de omvang van de lever;
  • misselijkheid.

Het hepatitis C-virus komt via de bloedvaten de levercellen binnen. De ziekteverwekker kan binnendringen via hemodialyse, via het gebruik van een geïnfecteerde naald, via tatoeage, in tandheelkundige en cosmetische kantoren.

Overdracht van het virus op de pasgeborene van een besmette moeder is mogelijk als de huid van de baby tijdens de bevalling gewond raakt. Een kwalitatieve analyse brengt een virus aan het licht en duidt op secundaire tekenen: de aanwezigheid van antilichamen in het bloed van de patiënt.

Het decoderen van de resultaten

Een hepatoloog of specialist in infectieziekten ontcijfert de resultaten van PCR en ELISA voor hepatitis C. De verkregen gegevens worden bevestigd door een uitgebreid onderzoek:

  • biochemische analyse;
  • Orgel echografie;
  • leverbiopsie.

Op basis van de verkregen gegevens bevestigt of ontkent de arts hepatitis C.

De standaardgevoeligheid van de PCR-test varieert van 10-500 IU / ml. Analyse geeft geen resultaat als deze onder de opgegeven parameter ligt.

Kwantitatieve PCR-analyse toont de virale lading: de concentratie van de ziekteverwekker in het menselijk lichaam (hoeveel fragmenten van flavavirus zitten er in 1 ml bloed). Deze onderzoeksmethode wordt voorgeschreven vóór het begin van de complexe therapie en in de 12e week van de ziekte. Hij helpt:

  1. Bepaal de ernst van de ziekte. Als de concentratie van het virus in het bloed van de patiënt hoog is, is overdracht van de infectie op anderen mogelijk.
  2. Antivirale therapie voorschrijven, de gewenste behandelmethode kiezen.
  3. Maak een voorspelling van herstel.

Het is belangrijk om het genotype te bepalen, omdat de ziekteverwekker voortdurend muteert en zich aan het lichaam aanpast. Er zijn 11 soorten bekend, drie zijn geïdentificeerd op het grondgebied van de Russische Federatie: 1, 2, 3. Het onderzoek zal het type virale infectie aantonen.

Bij het ontsleutelen schrijven ze:

  • RNA gedetecteerd;
  • RNA niet gedetecteerd (ziekte niet gedetecteerd);
  • type flavavirus;
  • kwantitatieve samenstelling (concentratie in bloed);
  • test naam.

RNA gedetecteerd

Als hepatitis C wordt aangetroffen in het biologisch materiaal van de patiënt, schrijft de arts een tweede onderzoek voor om een ​​fout uit te sluiten. Het onderzoek van het biomateriaal gebeurt van 1 tot 5 dagen. De uitvoeringstermijn is afhankelijk van de werkdruk van het personeel.

De aanwezigheid van flavavirus en antilichamen daartegen duidt op een lang verloop van de ziekte, die is overgegaan in een chronisch stadium. Valse indicaties komen voor bij zwangere vrouwen en bij mensen met andere infectieziekten.

RNA niet gedetecteerd

Bij kwalitatieve analyse werd hepatitis C niet gedetecteerd. Een negatieve waarde betekent dat er geen virus-RNA in het bloed zit. Vermoeidheid en andere tekenen kunnen verband houden met een andere infectie in het lichaam en vereisen verder onderzoek..

Wat te doen als hepatitis C-virus-RNA wordt gedetecteerd?

Als het virus in het bloed wordt aangetroffen, moet men niet wanhopen en in paniek raken. Bij 20 procent geneest de ziekte vanzelf. Antistoffen geven niet altijd aan dat u hepatitis C heeft. Er zijn laboratoriumfouten. Goedaardige en kwaadaardige tumoren, infectieuze haarden in het lichaam, eerdere vaccinaties smeren het PCR-beeld uit.

Vroege detectie helpt om de ziekte op tijd te stoppen. Antivirale therapie wordt voorgeschreven. Medicijnen helpen bij het genezen van een chronische ziekte binnen 3-6 maanden.

Kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C, interpretatie van resultaten

Hepatitis B en Hepatitis C: bloedonderzoek, zoals aangegeven, interpretatie van de resultaten

HBsAg- en HCV-bloedtest: wat is het, indicaties, decodering

Kwantitatieve analyse voor hepatitis B: interpretatie van indicatoren en hun norm

PCR-analyse voor hepatitis C: waar en hoe het correct door te geven, wat een positief en negatief resultaat betekent

PCR voor hepatitis C is een verplichte analyse bij het onderzoek van een patiënt met symptomen van leverschade. De studie wordt voorgeschreven om de diagnose te bevestigen en de meest volledige informatie te verkrijgen over de veroorzaker van de ziekte, de activiteit van de virale infectie. De resultaten dienen als basis voor het voorschrijven van antivirale therapie, het bepalen van de duur en het evalueren van de effectiviteit ervan..

Diagnostiek met behulp van de polymerasekettingreactietechniek is relatief recentelijk wijdverbreid. Sinds het midden van de jaren zeventig wordt er onderzoek naar dit onderwerp gedaan. Maar de eerste publicaties over de mogelijkheid om PCR in de praktijk te gebruiken, verschenen pas halverwege de jaren tachtig..

  • Soorten PCR
  • Indicaties voor de test
  • Waar te nemen?
  • Regels voor bloeddonatie
  • Het decoderen van de resultaten
  • Voordelen van PCR-diagnostiek
  • De kosten

Bij het uitleggen wat PCR is, benadrukken artsen dat dit de meest betrouwbare en betrouwbare analyse is voor hepatitis C. Met deze test kunnen niet alleen de RNA-deeltjes van het virus worden geïdentificeerd, maar ook de concentratie (geeft de activiteit van het infectieuze proces aan) en het genotype. De verkregen resultaten spelen een sleutelrol bij het bepalen van de tactiek en het schema van verdere therapie..

Wat is de essentie van het opvoeren van een reactie? Met behulp van bepaalde biologisch actieve stoffen wordt een toename van het aantal RNA-deeltjes van het virus in een klein volume bloed bereikt. Vervolgens worden delen van het genoom bepaald door verschillende fysisch-chemische methoden.

PCR wordt uitgevoerd met behulp van verschillende componenten:

  • Primer. Dit is een kunstmatig gesynthetiseerde verbinding waarin de nucleotidesequentie volledig identiek is aan een specifiek gebied van het RNA van het virus, dat geen mutaties en veranderingen ondergaat, afhankelijk van het genotype. Bepaling van RNA van het hepatitis C-virus wordt uitgevoerd met behulp van een strikt specifieke primer.
  • RNA-polymerase. Een enzym dat wordt gekenmerkt door stabiliteit en structurele stabiliteit tegen de achtergrond van temperatuurveranderingen die nodig zijn voor het juiste verloop van een chemische reactie. Biedt de constructie van een RNA-keten in een van de PCR-stadia.
  • Eiwitmengsel. Om extra RNA-secties te bouwen, is 'bouwmateriaal' nodig, waarvoor bepaalde verbindingen van de eiwitstructuur aan het biologische monster worden toegevoegd.
  • Buffer. Een mengsel dat de optimale pH-waarde handhaaft om de stroom van de polymerasekettingreactie te waarborgen.
  • Een monster van biologisch materiaal waarvan wordt vermoed dat het een HCV (hepatitis C-virus) RNA-monster bevat.

Bij sommige methoden voor het stageren van PCR worden bovendien RNA-sondes en andere interne controles gebruikt, die als controlemonsters worden gebruikt bij het identificeren van resultaten.

Het proces van het vergroten van gebieden van viraal RNA met behulp van een matrix wordt amplificatie genoemd. De reactie verloopt in verschillende fasen:

  1. Denatureren. Het proces van het "afwikkelen" van RNA-strengen wordt verzorgd door de temperatuur tot een bepaald niveau te verhogen.
  2. Gloeien. Na het verlagen van de temperatuur tot de vereiste waarden, hechten primers zich aan RNA. Deze fase is alleen mogelijk als de gewenste virusdeeltjes in het bloedmonster aanwezig zijn..
  3. Directe synthese van virale RNA-regio's met de deelname van enzymen.

De vermelde cycli van PCR-stadiëring worden enkele tientallen keren herhaald, wat een veelvoudige toename oplevert van het aantal RNA-regio's van de pathogeen van hepatitis C van het niveau bepaald door laboratoriummethoden.

Het bloedmonster wordt op de juiste manier voorbereid voordat het wordt getest. Het aanwezige RNA wordt geadsorbeerd op een dragerbuffer, vervolgens afgewassen en gebruikt om de polymerasekettingreactie op gang te brengen.

De resultaten worden gedetecteerd door elektroforese (horizontaal of verticaal) of door hybridisatie. De methode voor het decoderen van de resultaten van de reactie wordt gekozen op basis van de doelstellingen van het onderzoek (simpelweg RNA identificeren of de geschatte hoeveelheid bepalen).

PCR - de meest nauwkeurige bloedtest voor hepatitis C

De lijst met voorgestelde onderzoeken voor HCV bevat verschillende items die verschillen in kosten, gereedheidstijd en implementatiemethode..

Verwijzend naar de protocollen van de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO), omvat de procedure voor het diagnosticeren van een infectie verschillende opeenvolgende fasen..

Om te beginnen huren ze:

  • algemene analyse van bloed en urine;
  • bloed biochemie;
  • onderzoek naar glucosegehalte (strikt op een lege maag);
  • HIV-test;
  • fluorografie;
  • immunogram (als u de aanwezigheid van auto-immuunpathologieën vermoedt).

Als de parameters van de biochemische bloedtest afwijken van de fysiologische norm, wordt de patiënt een test voorgeschreven op basis van de detectie van specifieke antilichamen die worden geproduceerd door het contact van het virus met bloed (ELISA).

Maar zo'n bloedtest voor hepatitis C heeft een aanzienlijk nadeel. Het proces van antilichaamsynthese hangt af van de werking en productie van immuuncompetente cellen. De individuele kenmerken van het lichaam kunnen zowel een vals-negatieve als een vals-positieve reactie veroorzaken..

Alvorens een ELISA-test voor te schrijven, vertelt de arts de patiënt over een mogelijke fout, die een antwoordvraag oproept: "Welke bloedtest laat hepatitis C zien met een minimaal risico op onjuiste resultaten?" Om de diagnose te bevestigen of te weerleggen, is de meest nauwkeurige laboratoriumtest real-time PCR.

Verdere actietactieken zijn afhankelijk van wat het onderzoek laat zien. Als de diagnose wordt bevestigd, krijgt de patiënt onmiddellijk hepatoprotectors voorgeschreven, gewaarschuwd voor het belang van goede voeding en een gezonde levensstijl. Maar gerichte therapie is onmogelijk zonder de viral load en het hepatitis C-genotype te bepalen..

Sommige medicijnen kunnen een verergering van hepatitis B veroorzaken. Om complicaties uit te sluiten, worden daarom aanvullend tests op HBsAg voorgeschreven. HCV wordt alleen behandeld na een negatief testresultaat.

Soorten: kwalitatief, kwantitatief en genotypering

Bij de eerste diagnose van hepatitis C wordt de titer van de geproduceerde antilichamen bepaald door de serologische methode. Dit resultaat geeft grofweg de activiteit van het pathologische proces weer. Maar de arts kan de meest nauwkeurige informatie alleen krijgen na bestudering van de PCR-gegevens.

Momenteel wordt in bijna alle laboratoria de analyse uitgevoerd met behulp van een ultragevoelige methode. De diagnose HCV is dus mogelijk binnen 10-14 dagen na infectie, minder vaak - na 2,5-3 weken. Afhankelijk van de doelen die tijdens het onderzoek worden nagestreefd, schrijft de arts een specifiek type test voor.

Er zijn de volgende soorten PCR:

  1. Kwalitatief. Patiënten hebben bij het voorschrijven van diagnostische tests de vraag wat deze onderzoeksmethode laat zien. Kwalitatieve analyse met de PCR-methode is een zeer gevoelige test die de aanwezigheid van virus-RNA in het bloed bij een minimale concentratie vaststelt. Typisch wordt dit soort polymerasekettingreactie uitgevoerd met behulp van reverse transcriptietechnologie. Dit is een van de weinige PCR-methoden waarbij RNA als doelwit kan worden gebruikt.
  2. Kwantitatief. Met de kwantificering van hepatitis C kunt u het exacte niveau van HCV-RNA in uw bloed bepalen. Onderzoek is maar op één manier mogelijk: de real-time methode. Tijdens de voorbereiding van het materiaal voor PCR wordt een kleurstof aan het monster toegevoegd. Na elke amplificatiecyclus wordt een geautomatiseerd, real-time kwantitatief onderzoek uitgevoerd. De techniek wordt vaak uitgevoerd in combinatie met reverse transcriptie. Zo is het mogelijk om kwalitatief het kleine aantal RNA-kopieën van het virus te bepalen. Het is zinvol om het niveau van HCV-RNA kwantitatief vast te stellen als een positief resultaat van kwalitatieve PCR wordt verkregen..
  3. Genotypering. De analyse wordt uitgevoerd in de laatste fase van het diagnostische proces. Het principe van de studie is gebaseerd op het verschil in de nucleotidesequentie, die het ene genotype van het hepatitis C-virus van het andere onderscheidt. Gewoonlijk wordt de analyse gedaan door middel van multi-primer (multiplex) PCR.

Als u een drager van het virus vermoedt, is het noodzakelijk om hoogwaardige PCR uit te voeren. Als het resultaat negatief is, is de persoon waarschijnlijk gezond. Maar om infectie volledig uit te sluiten, wordt aanbevolen om de studie na 7-10 dagen te herhalen. Als het RNA van het virus wordt gedetecteerd, worden verdere tests uitgevoerd (kwantitatief en genotypering).

Indicaties voor een laboratoriumtest

De belangrijkste indicatie voor het doneren van bloed voor hepatitis C door middel van de polymerasekettingreactiemethode is een positieve enzymimmunoassay (ongeacht het type: totaal, gedifferentieerde test voor IgG en IgM).

Bovendien moet u controleren:

  • tijdens de zwangerschap (de test wordt twee keer gedaan - in het eerste trimester en 7-10 weken voor de geboorte);
  • bij het werken met een verhoogd risico op infectie (verpleegkundigen, laboratoriumassistenten, medewerkers van donorcentra, schoonheidsspecialisten, enz.);
  • met promiscue geslachtsgemeenschap en onbeschermd contact met een onbekende persoon;
  • tegen de achtergrond van hiv, kanker, het nemen van bepaalde medicijnen, enz.;
  • patiënten die verslaafd zijn aan intraveneuze medicijnen;
  • met het voortdurend uitvoeren van invasieve diagnostische of therapeutische procedures;
  • met een bloedtransfusie uitgevoerd vóór 1992 (voorheen waren er geen betrouwbare manieren om biologisch donormateriaal te controleren op de aanwezigheid van een virus).
  • wanneer een open wond in contact komt met het bloed van iemand anders, niet-gesteriliseerde medische instrumenten.

De incidentie neemt elk jaar toe. Daarom wordt aanbevolen om voor vroege detectie van infectie eenmaal per jaar laboratoriumtests op HCV uit te voeren..

Waar te testen

Bij contact met de kliniek heeft de patiënt recht op gratis tests. Maar eerst doen ze een ELISA-test. En alleen bij een positief of twijfelachtig resultaat wordt een PCR-studie getoond. Daarom kan een dringende diagnose worden gesteld door contact op te nemen met een betaald laboratorium, waar u bloed kunt doneren voor PCR op een voor de patiënt geschikt tijdstip. Tegelijkertijd wordt aanbevolen om onmiddellijk de indicatoren van leverenzymen, standaard klinische bloedparameters, te controleren.

In de regel is de studie van bloed met PCR in bijna elk laboratorium beschikbaar. Als het bloedinzamelpunt niet is uitgerust met de juiste apparatuur, wordt het biologische materiaal voor onderzoek vervoerd in overeenstemming met het temperatuurregime en andere voorwaarden. PCR in de kliniek is alleen mogelijk na andere onderzoeken, waarvan de resultaten indirect wijzen op de aanwezigheid van hepatitis C.

Hoe bloed correct te doneren

Voordat u bloed doneert voor de detectie van een mogelijk virus, moet u een aantal regels volgen om u voor te bereiden op de analyse..

De belangrijkste aspecten worden in de notitie aangegeven:

  1. Geef gedurende 5-7 dagen de consumptie van vet, gefrituurd voedsel en alcohol op. Over het algemeen raden artsen aan om zich te houden aan de voedingsregels voor dieet nummer 5.
  2. Eet 12-14 uur voor de studie niet. Je kunt alleen water drinken.
  3. Het is beter om 's ochtends bloed te doneren..
  4. Rook niet vóór de ingreep.

U moet de arts ook waarschuwen voor ingenomen medicijnen, mogelijke gezondheidsproblemen, chronische ziekten..

Bloed wordt uit een ader gehaald. Na het einde van de procedure dicht de verpleegkundige de prikplaats af met een steriele pleister, waarschuwt voor de noodzaak om de arm te buigen en deze gedurende 10-15 minuten in deze positie te houden. Anders is de kans op een pijnlijk hematoom groot..

Hoe lang duurt het onderzoek?

Hoeveel analyses worden uitgevoerd, hangt af van het laboratorium. De gemiddelde doorlooptijd varieert van 1-3 dagen. Sommige klinieken bieden een betaalde service voor snelle PCR-tests, maar de tijd wordt beperkt door de mogelijkheden van medische apparatuur..

In de kliniek kunnen de resultaten binnen 7-10 dagen aan de arts worden doorgegeven. Dit gaat gepaard met een grote toestroom van patiënten. Tegelijkertijd wordt biologisch materiaal volgens alle eisen opgeslagen.

Het decoderen van de resultaten

In de regel is het decoderen van PCR van hoge kwaliteit niet moeilijk. Maar om verkeerde interpretaties te voorkomen, moet u een arts raadplegen met het formulier dat u van het laboratorium hebt ontvangen. De opties, wat dit of dat type PCR betekent, worden weergegeven in de tabel.

Negatief: de persoon is gezond of de concentratie van viraal RNA in het bloed is te laag voor detectie.

Positief: de persoon is besmet

Uitgevoerd als virus-RNA wordt gedetecteerd door een kwalitatieve onderzoeksmethode.

Afhankelijk van de verkregen testresultaten wordt het viral load-niveau bepaald

Uitgevoerd voor hepatitis C, bevestigd door andere onderzoeksmethoden.

Met de analyse kunt u het exacte genotype van de pathogeen van de pathologie vaststellen

Maar vaak is er een situatie waarin ELISA voor hepatitis C positief is en PCR negatief. Alleen een arts kan dergelijke testresultaten ontcijferen..

Dergelijke gegevens zijn echter mogelijk in de volgende gevallen:

  • zwangerschap;
  • overgedragen in acute vorm hepatitis C;
  • HCV-behandeling voltooid;
  • de aanwezigheid van infecties die de kans op een vals positief ELISA-resultaat vergroten.

Alleen de polymerasekettingreactie toont de exacte aanwezigheid van een virale infectie in het lichaam. Tegen de achtergrond van een negatieve PCR geeft een positieve ELISA in de meeste gevallen aan dat de persoon niet besmet is. Maar de arts moet de exacte oorzaak van het vals-positieve resultaat bepalen..

Kwalitatieve analyse

Een kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C bevestigt de aanwezigheid van de ziekteverwekker in het bloed. Als het RNA van het virus niet wordt gedetecteerd, is de persoon gezond. Maar als een infectie wordt vermoed, wordt aanbevolen om het onderzoek opnieuw te ondergaan. Een positief resultaat duidt op infectie. Maar deze analyse laat niet toe om chronische hepatitis C te onderscheiden van acuut, en kan niet aantonen hoe actief het pathologische proces is..

Kwantitatieve test

Kwantitatieve analyse door PCR wordt uitgevoerd na bevestiging van de diagnose en de decodering ervan is belangrijk voor het bepalen van behandelingstactieken. Afhankelijk van de concentratie van deeltjes van de veroorzaker van hepatitis C, worden verschillende graden van virale lading onderscheiden: gemiddeld, hoog en laag. Hoe hoger de indicator, hoe ernstiger de infectie is en hoe moeilijker de therapie is. Normaal gesproken is viraal RNA afwezig in het bloed.

Genotypering

Veel laboratoria voeren genotypering uit in combinatie met kwantitatieve PCR, wat geld bespaart. Zo'n onderzoek wordt maar één keer gedaan, voordat de behandeling wordt gestart. Gewoonlijk wordt analyse uitgevoerd voor een van de vier meest voorkomende genotypen (1, 2, 3 of 4). Tegelijkertijd wordt het HCV-subtype bepaald. Genotypering voor ondersoorten 5 en 6 van hepatitis C is niet in elk laboratorium mogelijk.

Voordelen van PCR-diagnostiek

Diagnostiek met de PCR-methode is wijdverbreid vanwege:

  • hoge nauwkeurigheid (op voorwaarde dat de nieuwste generatie testsystemen worden gebruikt);
  • gemak van bemonstering van biomateriaal;
  • snelle resultaten (maximaal 5 dagen).

Maar het belangrijkste voordeel ligt in de brede diagnostische mogelijkheden van het onderzoek. De analyse maakt het niet alleen mogelijk om het virus te identificeren, maar ook om de concentratie in het lichaam nauwkeurig te bepalen en het genotype van de infectie vast te stellen. Daarnaast is kwantitatief onderzoek nodig om de effectiviteit van antivirale therapie te beoordelen. Het belangrijkste doel van de behandeling is om het testpercentage (d.w.z. het niet-detecteerbare niveau van HCV-RNA) te bereiken na 4, 12 of 24 weken van de antivirale kuur en dit resultaat te behouden..

De kosten

De kosten van PCR-analyse variëren per regio. Dus in Moskou zijn de prijzen hoger. Hoogwaardige PCR kost 600-800 roebel, kwantitatief - 2200-3000 roebel, genotypering - vanaf 1000 roebel. Hoeveel een bepaalde studie precies kost, kun je direct in het laboratorium, op de website van een medische organisatie of telefonisch te weten komen.

Kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C: kenmerken, interpretatie van resultaten

Virale hepatitis C is een van de meest ernstige ziekten waarmee een modern persoon te maken kan krijgen. Het probleem is dat deze ernstige ziekte praktisch asymptomatisch is en dat een persoon zich normaal kan voelen, terwijl een verraderlijke aandoening onherstelbare schade aan zijn lever veroorzaakt..

Om gevaarlijke gevolgen te voorkomen, is het noodzakelijk om HCV tijdig te diagnosticeren. Een van de beste diagnostische methoden is een kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C. Deze methode voor het identificeren van de diagnose is de meest informatieve en volledig pijnloze methode voor patiënten. Maar hoe kunt u zich laten testen op hepatitis C-PCR? Wat is deze analyse? Hoe wordt hepatitis C gediagnosticeerd door PCR? Laten we hierover praten in het artikel.

De analyse voor hepatitis C is kwalitatief - wat is het?

Momenteel zijn er veel methoden om virale ziekten te diagnosticeren, waaronder HCV. Maar een PCR-bloedtest voor hepatitis C - wat is het? Allereerst moet worden gezegd dat dit een studie is van het biologische materiaal van de patiënt voor de detectie van de HCV-ziekteverwekker. Een PCR-bloedtest voor hepatitis C wordt uitgevoerd in een laboratorium. Deze studie is vereist voor absoluut alle patiënten bij wie bloedantistoffen tegen hepatovirusantigenen zijn gevonden. Het belangrijkste doel van PCR-diagnostiek van hepatitis is om flavavirus te detecteren.

De afkorting PCR staat voor "Polymerase Chain Reaction". Dit betekent dat met behulp van deze analyse van hepatitis C kwalitatief het maximale gebied van schade aan levercellen en weefsels door hepatovirus wordt onthuld. Met deze analytische methode kunt u de kwantitatieve omvang van de schade aan het lichaam bepalen, evenals de kwalitatieve kenmerken van de ziekteverwekker..

Kwalitatieve PCR-hepatitis-testresultaten kunnen de behandeling van hepatologen helpen bij het bepalen van het HCV-behandelingsregime voor een bepaalde patiënt. Dankzij deze methode wordt ook de duur van het therapeutische beloop bepaald, omdat deze kan worden gebruikt om te bepalen hoe ernstig de infectie moet worden overwonnen..

Hoe u zich kunt laten testen op hepatitis C-PCR?

Bij het stellen van de diagnose HCV wordt een groot aantal verschillende onderzoeken uitgevoerd om de meest geschikte methode voor de behandeling van de ziekte in kwestie te identificeren. Maar hoe u een PCR-test voor hepatitis C moet doen?

Alvorens deze vraag te beantwoorden, moet worden verduidelijkt dat het type analyse dat wordt overwogen ook een RNA-test wordt genoemd. Het flavavirus bevat inderdaad een RNA-deeltje waarvan de afmetingen van het virion tussen 30 en 60 nm liggen. Het virus is vatbaar voor mutaties en hier wordt altijd rekening mee gehouden bij het diagnosticeren van dit type. De resistentie van elk genotype van de HCV-pathogeen verschilt significant, daarom is de prognose van het verloop van de ziekte sterk afhankelijk van deze analyse voor kwalitatieve hepatitis..

Maar hoe doneer je bloed voor PCR voor hepatitis C? Bij de diagnose zijn zowel de voorbereidende handelingen van de patiënt als de bloeddonatieprocedure zelf van groot belang:

  • Gedurende de dag voordat bloed wordt gedoneerd voor hoogwaardige PCR voor hepatitis, moet de patiënt stoppen met vet voedsel, alcohol en roken. Anders zijn de resultaten onnauwkeurig;
  • 'S Avonds, aan de vooravond van een bloedtest voor hepatitis met PCR, mag de patiënt niets eten;
  • Biologisch materiaal dient 's morgens vroeg, voor 8.00 uur, ingeleverd te worden. Hiervoor is het ten strengste verboden te eten en zelfs te drinken;
  • Een bloedmonster van de patiënt wordt verzameld uit een ader met behulp van een steriele wegwerpspuit. Als onderdeel van de persoonlijke veiligheid wordt de patiënt geadviseerd ervoor te zorgen dat de procedure uitsluitend met een steriele spuit wordt uitgevoerd..

Na het passeren van de analyse voor hepatitis C PCR, gaat de patiënt naar huis. Er wordt een beetje bloed afgenomen voor laboratoriumtests, dus er zullen geen negatieve effecten zijn van het onbeduidende verlies ervan..

Decodering van onderzoeksresultaten

Decodering van PCR-diagnostiek van hepatitis C wordt uitgevoerd in het laboratorium. Laboratoriummedewerkers voeren een aantal specifieke onderzoeken uit, waarvan het resultaat schriftelijk wordt vastgelegd. De gestandaardiseerde gevoeligheid van de test, waardoor het mogelijk is om de aanwezigheid en verspreiding van een ziekteverwekker te achterhalen, varieert van 10 tot 500 IU / ml.

Testresultaten worden op een vergelijkbare manier gedecodeerd:

  • Een positief resultaat duidt op een hoge concentratie van de ziekteverwekker in het bloed van de gastheer. In dit geval geldt: hoe hoger de indicator, hoe ernstiger de patiënt met HCV is;
  • Negatieve testresultaten duiden op een extreem lage concentratie hepatovirus in het bloed van een persoon. Als hepatitis C-PCR niet wordt gedetecteerd, moet voor volgende therapie de maximale gevoeligheidsdrempel van het biologische materiaal van de patiënt voor verschillende reagentia worden vastgesteld.

Na de studie van het biomateriaal vellen de medisch laboratoriummedewerkers een specifiek vonnis uit, dat verplicht wordt gedocumenteerd en gearchiveerd.

Wat moet de patiënt doen na ontvangst van de testresultaten?

Na ontvangst van de resultaten van de studie van bloedmonsters, moet de patiënt naar de behandelende arts gaan. Het wordt categorisch niet aanbevolen om zelfstandig conclusies te trekken over uw diagnose en een specifieke behandeling te plannen.

Afhankelijk van de testresultaten schrijft de hepatoloog een of ander therapeutisch regime voor met actieve antivirale middelen. Afhankelijk van het analytisch bepaalde HCV-genotype kunnen de volgende behandelingsregimes voor deze gevaarlijke ziekte worden voorgeschreven:

  • Sofosbuvir in combinatie met Ledipasvir in genotypes 1, 4, 5 en 6;
  • Sofosbuvir en Daklatasvir - op 1, 2, 3 en 4;
  • Sofosbuvir in combinatie met Velpatasvir - voor elk van de bekende pathogene genotypen.

Afhankelijk van de algemene toestand van het lichaam, de hepatovirusconcentratie en de kenmerken van de laesie, kan therapie worden voorgeschreven voor een duur van 12 of 24 weken, met of zonder ribavirine. De patiënt moet medicijnen kopen voor de hele therapeutische periode, omdat deze in geen geval kan worden onderbroken..

Het is echter helemaal niet nodig om geld te sparen voor dure Amerikaanse medicijnen - u kunt goedkopere Indiase analogen kopen. Deze medicijnen worden vervaardigd volgens een officieel recept. De lagere kosten houden verband met de mogelijkheid van massaproductie van het medicijn. Tegelijkertijd hebben Indiase fabrikanten zoveel vertrouwen in de hoge kwaliteit van hun producten dat ze hun klanten alle garanties bieden. Zo biedt Zydus Heptiza de Garantie op Herstel. Dit is een document volgens welke de patiënt het recht heeft op herbehandeling op kosten van het bedrijf als de vorige therapie niet heeft geholpen.

Belangrijk! Na aankoop van het medicijn moet de patiënt de aanbevelingen van de behandelende arts volledig opvolgen en het medicijn gedurende de gehele therapeutische periode dagelijks gebruiken..

Waar kan ik een kwalitatieve analyse voor PCR krijgen?

Dus het antwoord op de vraag "Hoe een PCR-analyse voor hepatitis C uitvoeren?" Ook is bekend wat er voor de patiënt gedaan moet worden na het betreffende onderzoek. Maar er blijft nog een dilemma over - waar het precies mogelijk is om bloed te doneren voor PCR-analyse voor hepatitis C van hoge kwaliteit.

Over het algemeen kunt u in ons land diagnostiek van dit type ondergaan:

  • In poliklinieken van de staat;
  • In privéklinieken met een exclusief serviceniveau;
  • In ziekenhuizen en klinische klinieken;
  • In onafhankelijke medische laboratoria.

Ook kan een PCR-bloedtest voor hepatitis C worden afgenomen in buitenlandse klinieken en laboratoria. Deze onderzoeksmethode behoort tot de standaard.

Wat u nog meer moet weten over een hoogwaardige bloedtest voor hepatitis C.?

Als er behoefte is aan PCR-diagnostiek van hepatitis C, moet u enkele kenmerken van deze vorm van testen kennen. Vooral:

  • De resultaten van de betreffende bloedtest kunnen al 4-5 dagen na infectie positief zijn voor HCV. Eiwitverbindingen worden later gevormd;
  • Bij het decoderen van de resultaten van een kwalitatieve bloedtest voor hepatitis C, kan een letter naast het pathogeengenotype staan. Bijvoorbeeld "1a". Dit is een subtype-aanduiding die op geen enkele manier de kenmerken van de therapie beïnvloedt;
  • Testresultaten worden zeer snel geleverd. De volgende dag na de diagnose ontvangt de patiënt het bijbehorende document;
  • Gelijktijdig met deze test wordt bloed afgenomen voor ELISA-onderzoek.

Er is een mening over een kwalitatieve test voor hepatitis C dat deze test van het bloed van de patiënt niet de beste manier is om het niveau van het HCV-type te bepalen. Deze mening is slechts gedeeltelijk waar, omdat de diagnose alomvattend moet zijn..

Kwalitatieve analyse voor hepatitis C: transcript

De oorzaak van de ontwikkeling van virale hepatitis C is een infectie met een ziekteverwekker die behoort tot de familie Flaviviridae. Er wordt een lang tijdsinterval gedetecteerd tussen infectie en het begin van de productie van antilichamen, waardoor een tijdige diagnose van de ziekte door middel van een enzym-immunoassay niet mogelijk is.

PCR-analyse voor hepatitis C, biochemie, CBC, levertesten worden uitgevoerd als een infectie wordt vermoed. Door de polymerasekettingreactie is het mogelijk om het virus in het bloed te detecteren, zelfs in de eerste week van infectie, wat het dominante voordeel van de methode is.

Kwantitatieve en kwalitatieve analyse voor hepatitis C en kenmerken van de studie, hoe voor te bereiden, of er fouten zijn, decodering - we zullen in detail bespreken.

Wat is de polymerasekettingreactiemethode?

Polymerase-kettingreactie is een moleculaire onderzoekstechniek om het genetisch materiaal van een viraal agens vanaf de eerste dagen van infectie te bepalen. De analyse kenmerkt zich door een hoge mate van betrouwbaarheid, specificiteit en nauwkeurigheid. Dankzij hem wordt niet alleen de afwezigheid / aanwezigheid van het virus gedetecteerd, maar ook de virale lading (kwantitatieve waarde), genotype.

Voor het onderzoek is het bloed van de patiënt nodig, waarin vermoedelijk het RNA van een virale infectie zit. Onder laboratoriumomstandigheden worden primers toegevoegd aan de biologische vloeistof - dit zijn kunstmatig gesynthetiseerde fragmenten van het gewenste gen met een korte lengte. Plus RNA-polymerase - een gespecialiseerd enzym dat de concentratie van het gewenste materiaal vermenigvuldigt.

Verder wordt het bloed met de toevoeging van componenten verschillende keren verwarmd en gekoeld in een speciaal apparaat. Dan komt de analyse van de verkregen resultaten, vergelijking met de bekende genen van het virale agens. Op basis hiervan wordt een conclusie getrokken over de ziekte.

Soorten PCR-onderzoek

Analyse voor hepatitis C PCR wordt uitgevoerd in het laboratorium met de toevoeging van de nodige reagentia, het heeft drie variëteiten met onderscheidende kenmerken:

  1. Kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C is de eerste fase van het onderzoek. Hierdoor wordt het genetisch materiaal van de ziekteverwekker in het bloedserum gedetecteerd.
  2. Met een kwantitatieve studie kunt u de virale lading schatten - dit is de inhoud van viraal materiaal in 1 ml bloed van een patiënt. Het wordt uitgevoerd voordat de behandeling wordt gestart en vervolgens na 1-4-12 weken therapie. Als de kuur lang is, moet het onderzoek na 24 weken therapie worden uitgevoerd om de effectiviteit te beoordelen.
  3. Genotypering. Een infectieziekte ontwikkelt zich snel, het virus heeft de neiging te muteren. Daarom is het noodzakelijk om het genotype van het virus te identificeren.

Wetenschappers hebben 7 genotypen van het virus geïdentificeerd. In de Russische Federatie komen 1-2-3 soorten veel voor.

Elk van de genotypen wordt gekenmerkt door resistentie tegen behandeling.

Bij type 1 is de effectiviteit van therapie bijvoorbeeld ongeveer 60%, tegen de achtergrond van 2-3 typen bereikt de indicator 85%.

Om de juiste medicijnen te vinden, de duur van de behandeling, moet niet alleen het feit van de infectie worden vastgesteld, maar ook de concentratie van het virus, het genotype ervan.

Indicaties voor

Markers voor hepatitis, PCR en ELISA, andere tests hebben bepaalde medische indicaties:

  • Wanneer een patiënt een voorgeschiedenis heeft van hiv-infectie, aids.
  • Contact met een besmette persoon, omdat virale hepatitis zeer besmettelijk is.
  • Symptomen van cirrotische leverschade - hepatomegalie, een toename van de milt, een veneus patroon verscheen op de buik, enz..
  • Kliniek voor functionele leverdisfunctie - periodieke / constante pijn in het rechter hypochondrium, gele verkleuring van de huid, misselijkheid.
  • Hoge waarden van AST en ALT in de bloedbiochemie.
  • Tijdens de zwangerschap, wanneer de leverfunctietesten slecht zijn.
  • Voordat u een antivirale kuur start om de virale lading te bepalen.
  • Om de effectiviteit van de therapie te volgen.
  • Na therapie om herhaling van virale infectie te voorkomen.

PCR wordt uitgevoerd met een bevestigde diagnose van hepatitis B om een ​​gemengd type leverschade uit te sluiten.

Voorbereiding voor onderzoek en bemonstering

Hoe u zich op de analyse moet voorbereiden, zal de arts u vertellen. Voorbereiding wordt de patiënt aanbevolen om een ​​nauwkeurig resultaat te verkrijgen. Het bestaat uit de volgende aanbevelingen:

  1. De analyse moet 's ochtends op een lege maag worden uitgevoerd. Het is toegestaan ​​om alleen schoon, niet-koolzuurhoudend water te drinken voordat bloed wordt afgenomen. Laatste maaltijd - 8 uur voor het ophalen.
  2. Als u de test 's ochtends niet kunt krijgen, kunt u dit' s avonds of tijdens de lunch doen, het belangrijkste - 5-6 uur na het eten, niet eerder.
  3. Laat alcoholische dranken, cafeïnehoudende dranken en sappen 48 uur voor het onderzoek achterwege.
  4. U dient gedurende 2 dagen een dieet te volgen, waarbij alle schadelijke producten worden uitgesloten. Sommige artsen zijn echter van mening dat vet, gefrituurd voedsel de nauwkeurigheid van de PCR-test niet beïnvloedt..

Gebruik geen medicijnen gedurende 24 uur vóór medische manipulatie. Licht uw arts in als dit niet mogelijk is. Het wordt niet aanbevolen de analyse uit te voeren onmiddellijk na echografie, CT, massage en andere fysiotherapieprocedures.

Bloedafname vindt als volgt plaats:

  • Door middel van een speciale tourniquet die op de onderarm van de patiënt wordt aangetrokken, stopt de arts de veneuze bloedstroom. Aders worden beter zichtbaar, waardoor het gemakkelijker wordt om een ​​naald in te brengen en vervolgens bloed af te nemen.
  • Het gebied van de huid vóór het inbrengen van een steriele naald wordt behandeld met een alcoholhoudende vloeistof.
  • Een naald wordt in de ader gestoken, waarna er een reageerbuis aan wordt bevestigd, waarin bloed stroomt.
  • Na het inbrengen van de naald wordt de tourniquet verwijderd. Verzamel de benodigde hoeveelheid bloed, verwijder de naald.
  • Een wattenstaafje gedrenkt in alcohol wordt op de injectieplaats aangebracht.

Om de vorming van een blauwe plek op de injectieplaats van de naald te voorkomen, is het noodzakelijk om het wattenstaafje hard genoeg op het geblesseerde gebied te drukken, de arm te buigen en deze 3-4 minuten in deze positie te houden.

Als de patiënt medicijnen gebruikt die het bloed verdunnen (aspirine, warfarine), kunnen er bepaalde problemen zijn met het stoppen van bloeden.

Voordelen van PCR ten opzichte van andere tests

De polymerasekettingreactiemethode heeft bepaalde voordelen ten opzichte van andere diagnostische technieken..

De voordelen van het onderzoek worden weergegeven in de tabel:

StudietypeMogelijk resultaat en beoogd transcript
PCR van hoge kwaliteit
Kwantitatief
Genotypering
Directe diagnose van de veroorzaker van pathologieAndere onderzoeken stellen ons in staat om een ​​antwoord te geven - is er een ziekteverwekker in het lichaam of niet. Maar met behulp van PCR-technieken kunt u specifiek het type virale agent vaststellen.
Bestudeer specificiteitPCR detecteert een uniek stukje DNA dat overeenkomt met slechts één type virale agent. Dit minimaliseert de kans op fouten..
Hoge gevoeligheidHet is mogelijk om zelfs een kleine concentratie van het virus in het bloed te detecteren.
Bepaling van alle ziekteverwekkersTijdens het onderzoek kunnen alle ziekteverwekkers worden opgespoord.
Latente infectiesNaast de virale ziekteverwekker kunnen infecties worden opgespoord die een latent verloop hebben en zich onderscheiden door een hoge antigene activiteit..

Wanneer een patiënt een positief resultaat krijgt, betekent dit dat het genetisch materiaal van de veroorzaker van hepatitis in de biologische vloeistof is aangetroffen. Negatief totaal - geen sporen van het virus.

Het decoderen van de resultaten

De arts moet de resultaten ontcijferen op basis van de conclusie die de patiënt in het laboratorium ontvangt. Het is noodzakelijk om de gegevens te analyseren in combinatie met indicatoren van biochemie, CBC, echografie.

Kwalitatief

Een kwalitatief onderzoek zal de aan- of afwezigheid van de veroorzaker van een virale ziekte in het menselijk bloed aantonen. Er kunnen twee opties zijn: negatief (norm) of positief resultaat.

Het formulier zegt soms: gevonden of niet gevonden.

Een positief resultaat - de laboratoriumassistent identificeerde het genetische materiaal van het virale agens in het bloed van de patiënt, de infectie werd bevestigd. Negatieve conclusie - er is geen infectie, de RNA-fragmenten van het virus liggen onder de gevoeligheidslimieten.

Kwantitatief

Kwantitatieve analyse impliceert verschillende opties voor de resultaten. Gemakshalve presenteren we ze in de vorm van een tafel..

ResultaatDecodering
NegatiefDit is de norm voor een gezond persoon. Dit betekent dat er geen viraal hepatitis-RNA in het bestudeerde biologische materiaal zit, of dat de inhoud lager is dan de gevoeligheidsdrempels.
Maximaal 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlGeeft aan dat het RNA-gehalte kleiner is dan het kwantificeringsbereik. Dit resultaat moet zorgvuldig worden geïnterpreteerd omdat het als controversieel wordt beschouwd. Bovendien worden er andere onderzoeken uitgevoerd voor latere vergelijking. Herhaal ook de PCR-test.
Maximaal 8 * 10 ^ 5 IU / mlLage virale belasting. Dit resultaat betekent in de regel dat de behandeling effectief is..
Vanaf 8 * 10 ^ 5 IU / mlHoge virale lading. Behandeling is onmiddellijk vereist (indien niet uitgevoerd), of correctie van medicatie is noodzakelijk.
2,4 * 10 ^ 7 IU / mlRNA is groter dan het bovenste kwantificatiemaximum. Tegen deze achtergrond wordt de viral load niet beoordeeld. Een tweede onderzoek met een verdunning van een biologisch vloeistofmonster is vereist.

Genotypering

Resultaat - ribonucleïnezuur van een specifiek genotype werd gevonden. Bovendien worden het genotype en het subtype aangegeven, de laboratoriumassistent codeert de conclusie in Latijnse letters en cijfers. Bijvoorbeeld genotype 1a. In totaal worden 7 genotypen en 67 subtypen onderscheiden.

Resultaat - RNA van het hepatitis C-virus werd gedetecteerd - dit is DNA van een zeldzaam genotype dat niet kan worden toegeschreven aan gewone virale agentia, daarom is aanvullende diagnostiek vereist.

Wanneer PCR negatief is en ELISA positief

Ontcijfert de conclusie van de laboratoriumassistent hepatoloog of specialist infectieziekten. Er is altijd een risico op een vals negatief of vals positief resultaat. Soms komt het voor dat PCR negatief is en ELISA positief.

Dit betekent dat er op dit moment geen virus in het bloed van de patiënt zit, maar dat hij een acute ziekte heeft gehad. Algemeen wordt aangenomen dat ELISA antilichamen vertoont die worden geproduceerd door het immuunsysteem na de invasie van de ziekteverwekker in het lichaam..

ELISA wordt, in vergelijking met PCR, gekenmerkt door een lage betrouwbaarheid en betrouwbaarheid, daarom wordt het gebruikt als primaire screening. Bij het diagnosticeren van virale hepatitis is de polymerasekettingreactie onmisbaar.

De kosten van testen op hepatitis C

U kunt testen doen in het ziekenhuis waar de patiënt wordt geobserveerd, als daar een laboratorium is, of u kunt tegen betaling naar een privécentrum gaan.

In korte tijd kunt u het resultaat krijgen in laboratoriumcentra zoals Gemotest, Invitro, Helix.

Onderzoekskosten afhankelijk van het laboratorium:

Naam van laboratoriumdienstPrijsbeleid
Helix· De kosten voor het bemonsteren van biologisch materiaal - 170 roebel.

Kwalitatief + kwantitatief onderzoek volgens de PCR-methode - 3990 roebel.

Detectie van antilichamen van een virale ziekte - 1.500 roebel (2-3 dagen).

Controle van de activiteit van het virus voordat u met de therapie begint - 4090 roebel.

InvitroKwantitatieve detectie van RNA van het hepatitis C-virus door PCR - 3140 roebel.

Verzameling van biologisch materiaal (veneus bloed) - 199 roebel.

Beoordeling van virale belasting met realtime detectie - 18.000 roebel.

Hoogwaardige ultragevoelige test - vanaf 3000 roebel.

Genotypering - vanaf 1250 roebel.

HemotestKwantitatieve onderzoeksprijs 2200 roebel.

Hoogwaardige diagnostiek vanaf 700 roebel.

Bepaling van het RNA van de ziekteverwekker - vanaf 4000 roebel.

Bloedafname uit een ader ongeveer 150 roebel.

De duur van het onderzoek is gemiddeld 2-3 dagen. In sommige laboratoria is er een service als een urgente analyse, de kosten zijn 1,5-2 keer hoger. Het is ook mogelijk om een ​​medisch specialist thuis te bellen om bloed te doneren en de uitslag per e-mail of persoonlijk te ontvangen wanneer u contact opneemt met het laboratorium..